Op 12 Oktober, 2021, voor het eerst openbaren het team van Zhou Xi van Wuhan-Instituut van Virologie/de Staat het Zeer belangrijke Laboratorium van Virologie, Chinese Academie van Wetenschappen en Lulu Team van het Ministerie van Onderwijs van Medische Moleculaire Virologie/Zeer belangrijk die Laboratorium van Gezondheid en de Gezondheidscommissie van Fudan-Universiteit gezamenlijk in „Immuniteits“ tijdschrift getiteld wordt gepubliceerd het onderzoeksdocument „Remming van viraal ontstoringsapparaat van RNAi-proteïnen door designerpeptides tegen enteroviral besmetting“ beschermt in vivo dat het rationele ontwerp van polypeptideinhibitors de ontstoringsapparaten van darmvirusrnai specifiek om te richten het VSR-effect van het virus kan effectief breken. De remming van RNAi geeft volledig de antiviral immune functie van RNAi vrij, die een sterk bewijs is dat het immune mechanisme van RNAi nog in zoogdieren bestaat. wegens de goede antiviral activiteit en de hoge die veiligheid door dit immune mechanisme in cellen en dieren wordt tentoongesteld, is zijn potentieel voor klinische ontwikkeling uiterst hoog.
Immune oorlog: beide partijen die aan oorlog op elk ogenblik deelnemen, een slagveld met frequente middelen
Sinds het begin van het leven, is het vriendelijk hello en me, maar het wrede slagveld van uw leven en geen dood. Of u krijgt uit mijn gras of u blijft en bent een deel van me.
Van macroschaalstekels, hoornen, klauwen, en tanden, aan fagocytose, ontbinding, en vergiftiging op het cellulaire niveau, aan het knipsel, de interferentie, en de degradatie van moleculaire structuren; van in vitro aan in vivo, van extracellulair tot intracellular: Onthaal aan de slag van Difen A van het leven en een dood-slag van immuniteit die op elk ogenblik begint.
RNAi - een natuurlijk en efficiënt antiviral immuun mechanisme
In deze onbeperkte oorlog, is er een natuurlijk (de belangrijkste zaken regelen genuitdrukking, en de zijzaken zijn tegen virusinvasie), efficiënt, stabiel en alomtegenwoordig (hoogst behouden) immuun mechanisme - RNAi (RNAinterferentie), die om in de belangrijkste antiviral functie in paddestoelen, installaties en ongewervelden wordt overwogen te zijn. In het kort, wordt double-stranded RNA (dsRNA) door virusreplicatie wordt geproduceerd erkend door de RNAi-proteïne van wegdicer en in virus-afgeleid klein mengend RNA (virale siRNA, vsiRNA) gespleten, en in hetVeroorzaakte complex dan geassembleerd tot zwijgen brengen (hetVeroorzaakte complex die tot zwijgen brengen). complex, RISC), daardoor richtend de degradatie van viraal RNA. Navenant, hebben de meeste virussen ook overeenkomstige tegenstrijdige mechanismen, d.w.z., aan antiviral immuniteit van vluchtrnai door virale RNAi-ontstoringsapparaten geëvolueerd (Viraal Ontstoringsapparaat van RNAi, VSR) te coderen.
Ontdekking van de immune mechanismen van RNAi in zoogdieren
Nochtans, aangezien vsiRNA door het splijten van viraal RNA wordt gevormd niet in zoogdiercellen is gevonden, wordt het immune mechanisme van RNAi beschouwd als om een „evolutief overblijfsel“ dat werd verlaten nadat de zoogdieren andere antiviral mechanismen dat ontwikkelden. Nochtans, sinds 2017, hebben een aantal verwante studies een verscheidenheid van die VSRs uit virussen is voortgekomen gevonden, bevestigend dat het immune mechanisme van RNAi niet in zoogdiercellen verdwijnt, maar door virussen geremd. Tegelijkertijd, met de ontdekking van VSR-proteïnen door een verscheidenheid van belangrijke menselijke virussen worden gecodeerd, is het moleculaire mechanisme van zijn antagonisme van RNAi-weg die geopenbaard.
VSR-gerichte peptides: een nieuwe richting voor drugontwikkeling
In deze studie, ontwierp het onderzoekteam twee die innovatively VSR-Richtende peptides (VSR-Richt peptides, VTP), P1 en P2, op de spiraalvormige opeenvolgingen van A1 en van A2 van de darmvirus ev-A713A VSR proteïne wordt gebaseerd. Door de accumulatie van RNA ev-A71 in de geselecteerde cellenvariëteiten te ontdekken, toonde men dat zowel P1 als P2 effectief virusreplicatie op een dose-dependent manier remden.
Dan, volgens de experimentele resultaten, werd een reeks peptides verder samengesteld met betrekking tot de P2-opeenvolging met beter effect, en men vond dat de D-Omgekeerde die transcriptie-transformatie isoform (ER-DRI) wordt gewijzigd van peptide ER het beste remmende effect op virale RNAreplicatie had. om te bevestigen dat deze reeks van VTPs richt en ev-A71 3AVSR buiten werking stelt en de antiviral activiteit van RNAi opent, werd totaal RNA van besmette cellen gehaald en werd diep-gerangschikt. De resultaten toonden aan dat ontdekt vsiRNAs inderdaad werd afgeleid uit ev-A71. Onder hen, werden de reiniging en de extractie van ev-A71 virusrna in besmette cellen uitgevoerd gebruikend Uitrusting van de RNAisolatie van Qiagen en van Foregene de Virale. (Die Deze uitrusting gebruikt de de rotatiekolom en formule door Foregene wordt ontwikkeld, die high-purity en hoogstaand viraal RNA uit steekproeven zoals plasma, serum, lichaamsvloeistof zonder cellen, en celcultuur kan efficiënt halen
bovendrijvend. De uitrusting voegt specifiek Lineaire Acrylamide toe, die kleine hoeveelheden RNA van de steekproeven kan gemakkelijk vangen. RNA-slechts kan de Kolom RNA efficiënt binden. De uitrusting kan een groot aantal steekproeven tegelijkertijd verwerken.
De volledige uitrusting bevat geen RN-ase, zodat zal gezuiverd RNA niet gedegradeerd worden. De buffer viRW1 en de Buffer viRW2 kunnen ervoor zorgen dat het verkregen virale nucleic zuur vrij van proteïne, nuclease of andere onzuiverheden, die direct voor stroomafwaartse moleculaire biologieexperimenten kunnen worden gebruikt.)
De Isolatieuitrusting van Vrialrna
Tegelijkertijd, kon VTP geen antiviral effect op virus ev-A71 met verandering en schrapping van functie 3a-VSR, evenals in Dicer1 of AGO2-Ontoereikende cellen uitoefenen besmet met virus ev-A71. Men bewijst dat zijn mechanisme van actie inderdaad 3a-VSR richt en van de RNAi-weg afhangt.
Om het preclinical potentieel van ER-DRI te onderzoeken, evalueerde het onderzoeksteam zijn antiviral effect in ev-A71 virus-besmette muizen door intraperitoneal injectie van fluorescently geëtiketteerde peptides. De resultaten toonden aan dat ER-DRI ook RNAi bevorderde antiviral immune reactie in muizen, de replicatie van ev-A71 remde, de klinische symptomen van besmette die muizen verbeterde, en de dood van muizen verminderde door besmetting wordt veroorzaakt. Tegelijkertijd, toonde de scherpe giftigheidstest aan dat ER-DRI geen duidelijk kwaad aan de gezondheid van muizen had.
Het immune die mechanisme van RNAi door VTPs wordt geopend is krachtig genoeg om efficiënte antiviral activiteit te bemiddelen, duidelijk aantonend het fysiologische belang en de therapeutische haalbaarheid van RNAi als antiviral immuniteit in zoogdieren. Bovendien heeft deze studie aangetoond dat VSRs druggable doelstellingen is, die een nieuwe strategie verstrekken om VSRs voor antiviral therapie te richten, en peptides zoals ER-DRI aanzienlijke belofte als eerste-in-klasse VTDs voor darmvirusbesmettingen inhouden.
Artikelverbinding: De remming van viraal ontstoringsapparaat van RNAi-proteïnen door ontwerperpeptides beschermt in vivo tegen enteroviral besmetting - PubMed (nih.gov)
Productverbinding: De virale Uitrusting van de RNAisolatie
Uw bericht moet tussen de 20-3.000 tekens bevatten!
