RNApull-down

RNApull-down

Inleiding:

De RNAmolecules kunnen uitgebreid met andere biologische molecules, zoals proteïne, DNA en RNA in wisselwerking staan, en zo in cellen en organismen in de vorm van macromolecular complexen bestaan. Onder hen, zijn de RNA-Eiwitcomplexen het bestaan en de functie van RNA Één van de belangrijke vormen van. RNApull-down is een klassieke methode om RNAmolecules, vooral de op elkaar inwerkende proteïnen van lncRNAmolecules te onderzoeken en te identificeren, en door de meerderheid van onderzoekers en internationale gebiedende academische dagboeken erkend. Vandaag zal FORREGENE met u het experimentele principe en het technische proces van RNApull-down delen, misschien kunt u het gebruiken

1. Het experimentele principe van RNAtrekkracht onderaan technologie:

De transcriptie en de synthese in vitro van biotine-geëtiketteerd die doel lncRNA of lncRNA fragmenten (met inbegrip van RNAfragmenten als positieve en negatieve controles worden gebruikt), en broeden met celuittreksels uit; compliceert de gebruik avidin-verankerde magnetische parels om RNA-Proteïne of RNA-RNA te verzamelen, na grondige was, wordt het complex uitgewassen. Als het ontdekken van de eiwitdoelmolecule die met lncRNA in wisselwerking staat, voer eiwitelektroforese op de RNA-Trekkracht onderaan product uit, ontdek de doelproteïne door zilver die, en snijd het gel voor massaspectrometrie bevlekken; voer ook direct westelijke vlekkencontrole op het pull-down product uit; indien ontdekt voor de molecules van het RNAdoel die met lncRNA in wisselwerking staan, wordt de RNA-Trekkracht onderaan producten onderworpen aan RNAextractie en de specifieke opsporing qRT-PCR wordt uitgevoerd.

2. RNAtrekkracht onderaan het proces van het technologieexperiment:

• De technische dienst voor RNAtrekkracht neer van FOREGENE:

Celcultuur

Voorbereiding van celtotaal/kern/plasma eiwituittreksel

RNAtrekkracht onderaan experiment

Sds-PAGINA elektroforese, zilveren vlek

Massaspectrometrie en WB experimenten

Experimenteel rapport

• Experimenteel geval

Het volgende cijfer toont de resultaten neer van bio-Biornatrekkracht van FJ en sds-PAGINA elektroforeseopsporing, waarin de rode pijl de verschilband merkt:

Het onderzoeksteam Professor Song Xu van de Universiteit van Sichuan heeft 15 jaar van accumulatie op lange termijn op het gebied van lncRNAonderzoek geaccumuleerd. Foregene Bio en Professor Song Xu het onderzoeksteam werkten samen om de RNAtrekkracht onderaan technologie van lncRNA te lanceren, die u een bevredigend resultaat voor uw experiment zal geven.