FOREGENE één van de Mengelingsuitrustingen van Stap rechts-PCR Hoofd rechts-PCR EasyTM I voor QPCR-Reactie

FOREGENE éénfasige rechts-PCR Hoofd rechts-PCR EasyTM I van Mengelingsuitrustingen (Één Stap) Voor qPCRreactie

Rechts-PCR EasyTM I (Één Stap)

Cat.No.RT - 02011/02012

Éénfasige Hoofdmengeling rechts-PCR

Voor onderzoek slechts gebruik

Opslag bij -20℃

Productinleiding

De reeksproducten van Foregene realiseren de Éénfasige rechts-PCR EasyTM de geïntegreerde reactie van RNA op double-stranded DNA, d.w.z., omgekeerde transcriptie en PCR de versterking wordt voltooid in dezelfde buis van de reactiecentrifuge en hetzelfde reactiesysteem, dat de experimentele stappen vereenvoudigt, optimaliseert het experimentele programma, en verbetert de experimentefficiency.

Rechts-PCR EasyTM I (Één Stap) is een éénfasige die uitrusting rechts-PCR speciaal door Foregene wordt ontwikkeld, die ononderbroken verrichting van rechts aan PCR in dezelfde buis realiseert. De verrichting is eenvoudig en snel, wat de verontreiniging tijdens het experiment kan effectief verminderen. De Mengeling van 2×rt-PCR EasyTM heeft sterke tolerantie, thermische stabiliteit, hoog rendement en specificiteit voor versterking.

Eigenschappen

De éénfasige uitrusting laat dat omgekeerde transcriptie en PCR toe worden uitgevoerd in dezelfde buis. Het moet slechts malplaatjerna, specifieke PCR inleidingen en RN-ase-Vrije ddH2O toevoegen.

De kwantitatieve analyse in real time van RNA kan snel en nauwkeurig worden uitgevoerd.

De uitrusting gebruikt een unieke omgekeerde die de transcriptiereagens van Foregene en de Polymerase van DNA van Foregene HotStar Taq met een uniek reactiesysteem wordt gecombineerd de versterkingsefficiency en de specificiteit van de reactie effectief te verbeteren.

Het geoptimaliseerde reactiesysteem maakt de reactie hogere opsporingsgevoeligheid, sterkere thermische stabiliteit, en betere tolerantie hebben.

Kit Contents

Vervoer en opslagvoorwaarden

1.Transportation voorwaarden

Het gehele proces van vervoer het bij lage temperatuur van de ijsdoos, om ervoor te zorgen dat de uitrusting in een staat van is <4>

2. Opslagvoorwaarden

Rechts EasyTM I wordt opgeslagen bij -20°C.-Opslag het product in een constante temperatuurijskast bij -20°C onmiddellijk na ontvangstbewijs. Als de opslagvoorwaarden aangewezen zijn, zal het product geen prestaties tijdens de geldigheidsperiode van één jaar degraderen.

De informatie van de uitrustingscomponent

2× de Mengeling van rechts-PCR EasyTM: Foregene Omgekeerde Transcriptase, RN-aseinhibitor, de Polymerase van DNA van Foregene HotStar Taq, dNTPs, Mg2+, reactiebuffer, optimizer en stabilisator, enz.

Voorzorgsmaatregelen: (De voorzorgsmaatregelen zorgvuldig gelieve te gelezen alvorens de uitrusting te gebruiken)

Voor malplaatjes, wordt het geadviseerd die RNA uit verse die steekproeven wordt gehaald of te gebruiken bij -80℃ wordt opgeslagen (RNA zou het herhaalde bevriezen en het ontdooien moeten vermijden).

om RN-aseverontreiniging te vermijden, zou de experimentverrichting in de RN-ase-Vrije ruimte moeten worden uitgevoerd; de gebruikte pipetuiteinden en PCR centrifuge de buizen moeten RN-ase-Vrij zijn; en de beschikbare handschoenen en de maskers zouden moeten worden gedragen. V3o3or gebruik, zet de Mengeling van 2×rt-PCR EasyTM op ijs om me volledig te smelten flick en v3o3or gebruik mengen goed; de voorbereiding van het systeem zou op een ijsbad moeten worden in werking gesteld om de prestaties van de uitrusting en de specificiteit van PCR versterking te verbeteren.

De concentratie van malplaatjerna

Rechts-PCR EasyTM I (Één Stap): (totaal RNA van 0.1pg-1μg)/20μl-systeem

Verrichtingsgids

A: Voorbereiding van materialen en reagentia

1. Bereid het voorbereide RNAmalplaatje (het wordt geadviseerd om van de RNAisolatie van Foregene te gebruiken de Totale uitrustingen van de de Uitrustingsreeks om RNA te halen en te zuiveren), specifieke inleidingen (10μM) en verwante verbruiksgoederen en instrumenten voor.

Nota: Verzeker gelieve de integriteit van RNA en te proberen die RNA te gebruiken uit verse steekproeven wordt gehaald.

2. De Mengeling van plaats2× rechts-PCR EasyTM en RN-ase-Vrije ddH2O op een ijsbad om het te laten natuurlijk, en flick de buismuur smelten zich voor later gebruik goed te mengen.

B: Rechts-PCR systeemvoorbereiding

De Mengeling van 2×rt-PCR EasyTM is geschikt en snel te gebruiken, vermijdend verontreiniging tijdens verrichting en experimentele die fouten door veelvoudige voorbereidingen van het reactiesysteem zoveel mogelijk wordt veroorzaakt. Wanneer het gebruiken, slechts voegt de helft van het volume van het reactiesysteem (bijvoorbeeld, als het reactiesysteem 20μl is, neem 10μl-de Mengelingsoplossing van 2×rt-PCR EasyTM), passend bedrag RNAmalplaatje en specifieke inleidingen toe, en voegt RN-ase-Vrije ddH2O toe om het volume omhoog te maken. Verwijs naar Lijst 1 hieronder voor de specifieke rechts-PCR voorbereiding van het reactiesysteem.

Vorm 1: Rechts-PCR systeemvoorbereiding

1*: Gewoonlijk is de definitieve concentratie van inleiding 0.20.25μM om betere resultaten te krijgen. Wanneer de reactieprestaties slecht zijn, kan de inleidingsconcentratie binnen de waaier van 0.10.5μM worden aangepast.

Nota: De voorwaartse Inleiding en de Omgekeerde Inleiding zijn de specifieke inleidingen voor het doelgen; 50μl het systeem, gelieve te verwijzen naar het 20μl-systeem om de reagensdosering proportioneel aan te passen.

C: Rechts-PCR reactieprogramma het plaatsen

• Na zacht het voorbereiden van het systeem rechts-PCR met betrekking tot de bovengenoemde lijst, mengeling (u kunt pipetuiteinde gebruiken om zacht te blazen; u kunt zich ook op een vortexer mengen en kort centrifugeren om de vloeistof te verzamelen op de buismuur of de buis GLB wordt verspreid, en op ijsdoos te plaatsen die voor later gebruik).

2. Verwijs naar de rechts-PCR montages van het reactieprogramma (Lijst 2) om de temperatuur en de tijd van de reactie te plaatsen.

Nota: om de activiteit van de Mengeling van 2×rt-PCR te verzekeren EasyTM en zijn versterkingsefficiency te verbeteren, is het best om het rechts-PCR reactiesysteem voor te bereiden na het plaatsen van het PCR instrumentenprogramma, zodat het reactieprogramma kan onmiddellijk zijn ingegaan nadat het systeem wordt voorbereid.

Vorm 2: Rechts-PCR reactiesysteem het plaatsen

Nota: De bovengenoemde procedure is voor slechts verwijzing. De daadwerkelijke reactievoorwaarden variëren afhankelijk van de structurele voorwaarden van het malplaatje, de inleidingen, enz. Voor RNAmalplaatjes met complexe secundaire structuren, moet de reactietemperatuur voor de eerste stap van omgekeerde transcriptie 50°C. zijn. In de specifieke verrichting, is het noodzakelijk om de optimale reactievoorwaarden, met inbegrip van onthardende temperatuur, uitbreidingstijd, enz. volgens de specifieke voorwaarden van de grootte van het doelfragment, de basisopeenvolging van het vergrote fragment, en de GC inhoud en de lengte van de inleiding te ontwerpen.
Rechts-PCR Verrichtingsdiagram