Directe PCR van het installatieblad plus Uitrustingsung PCR de Polymeraselysis van Uitrustingsdna het Blad van de Bufferinstallatie voor Transgenic Installaties

Directe PCR van het installatieblad plus PCR uitrusting-UNG de Polymeraselysis van Uitrustingsdna het blad van de bufferinstallatie voor transgenic installaties

Beschrijving:

Directe keurt PCR van het installatieblad plus uitrusting-UNG een uniek lysis buffersysteem goed, dat genomic DNA van bladsteekproeven van installaties met hoge polysaccharide en polyphenol inhoud (zoals katoen, banaan, enz.) voor PCR reactie kan snel vrijgeven. De bladeren te hoeven niet worden gemalen of worden verscheurd wanneer behandeld met lysis buffer, die tot hen maken ideaal voor genetische testen het op grote schaal.
Het proces om genomic DNA van de lysis buffer vrij te geven kan binnen 5-10 minuten, zonder de behoefte aan andere processen van deproteinization, RNA of secundaire metabolites worden voltooid, en vrijgegeven spoordna kan als malplaatje voor PCR reactie worden gebruikt.
2× bladpcr EasyTM de Mengeling heeft een sterke weerstand tegen PCR reactieinhibitors, en kan het splijtenproduct van installatiemateriaal als malplaatje voor efficiënte en specifieke versterking direct gebruiken. De reagens bevat DNA-D-Taq Polymerase, dNTPs, MgCl2, reactiebuffer, PCR reactieversterker, optimizer, en stabilisator voor directe PCR reacties speciaal wordt gebouwd die. Het kan in combinatie met directe lysate worden gebruikt om steekproeven snel en gemakkelijk te ontdekken, en heeft de kenmerken van hoge gevoeligheid, sterke specificiteit en goede stabiliteit.
2× bladpcr EasyTM de Mengeling (UNG) vervangt dTTP met dUTP op basis van 2× Bladpcr Mengeling, en voegt UNG-tegelijkertijd enzym (racil-n-glycosylase) toe dat kan het malplaatje degraderen die dUTP bevatten. Vóór de PCR reactie, wordt het PCR product die uracil bevatten gedegradeerd door UNG enzym. UNG-het enzym zal geen effect op het malplaatje dat geen uracil bevat, hebben om de specificiteit en de nauwkeurigheid van versterking te verzekeren en de mogelijkheid te verhinderen van genetische testen het op grote schaal. PCR de problemen van de productverontreiniging doen zich voor.
DNA-D-Taq de polymerase is een DNA-polymerase voor directe PCR reacties speciaal wordt ontwikkeld die. DNA-D-Taq de polymerase heeft sterke tolerantie aan een verscheidenheid van PCR reactieinhibitors, en kan spoorhoeveelheden DNA in diverse complexe reactiesystemen efficiënt vergroten. De versterkingssnelheid kan 2Kb/min. bereiken. Het is vooral geschikt voor Directe PCR reactie.
Volgens de verschillen van installatiesteekproeven, zijn de producten verdeeld in twee categorieën: Directe PCR van het installatieblad Uitrusting en Directe PCR van het Installatieblad plus Uitrusting voor polysacchariden en polyphenols; in het PCR opsporingsstadium, kan het volgens de experimentele behoeften zijn, de gemeenschappelijke 2× Bladpcr EasyTM Mengeling of de 2× Bladpcr EasyTM Mengeling (UNG) kiezen die het effect van het verhinderen van de verontreiniging van PCR versterkingsproducten heeft.

Specificaties:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns

Uitrustingscomponenten:

Eigenschappen & voordelen:

- Geen tijdrovende en dure DNA-reiniging

- Minder materieel

- De eenvoudig-steekproef kan aan PCR reactie of lysis reactie worden onderworpen zonder knipsel of het malen

Fouten van de de steekproeflading van -2X de mengeling-Verminderende en de voorbereidingstijd van het reactiesysteem

- De snel-malplaatjevoorbereiding kan binnen 10 minuten worden voltooid, PCR kan de reactie binnen 50 minuten worden voltooid

- Hoge kan de productie-lysis reactie in PCR van 96 worden voltooid goed plaat

Uitrustingsparameters:

Toepassing: Identificatie van transgenic installaties, het genotyping, enz.

Steekproef: installatiebladeren

Steekproefgrootte: Diameter 23mm (directe methode), diameter 57mm (lysis methode)

Opsporingswaaier: PCR product ≤1kb

Kit Component Information

- Buffer PS1: Verstrekt het vereiste milieu voor lysis van het installatieblad reactie.

- Buffer PS2: De aanvulling verstrekt het vereiste milieu voor de lysis reactie van polysacchariden en polyphenols in installatiebladeren.

- Buffer P2: Neutraliseert lysate zodat het zich niet in verdere PCR reacties mengt.

- 2× bladpcr EasyTM Mengeling (UNG): Op basis van Blad 2× PCR EasyTM wordt de Mengeling, dUTP gebruikt om te vervangen dTTP, en tegelijkertijd, UNG-wordt het enzym dat kan het malplaatje degraderen die dUTP bevatten toegevoegd, wat de verontreiniging van PCR versterkingsproducten kan effectief verhinderen. Bevat DNA-D-Taq Polymerase door Fuji Bio, UDG, dNTPs, MgCl2, reactiebuffer, PCR reactieversterker, optimizer en stabilisator speciaal wordt gewijzigd die. Voor PCR reactie, voeg enkel de aangewezen lysis mengeling toe, inleidingen, ddH2O aan 2× Bladpcr EasyTM Mengeling (UNG) en het kan voor PCR reactie worden gebruikt.

- 6× DNA-Ladingsbuffer: Deze Ladingsbuffer bevat geen SDS. Het wordt geadviseerd die de DNA-6× Ladingsbuffer te gebruiken van de uitrusting wordt voorzien wanneer het uitvoeren van agarose gelelektroforese om goede elektroforeseresultaten te verkrijgen. Gebruik Ladings geen Buffer die SDS bevatten, anders zal er een grote staart van licht in de zwemmende steeg tijdens elektroforese zijn, die de experimentele resultaten zal beïnvloeden.

Het werkstroom:

Elektropherogram:

Opslag en Houdbaarheid:

Een deel I van deze uitrusting zou bij kamertemperatuur of 2-8℃ moeten worden opgeslagen.

- De reagentiabuffer P1, Buffer P2, 6×DNA-Ladingsbuffer kan 12 maanden in de droge omstandigheden worden opgeslagen; indien nodig om voor een langere tijd worden opgeslagen, kunnen de reagentia bij 2-8℃ worden opgeslagen.

Een deel II van deze uitrusting zou bij -20℃ moeten worden opgeslagen.

- PCR EasyTM van de reagentiabuffer 2×Leaf de Mengeling, indien vaak gebruikt, kan ook bij 4℃ voor opslag op korte termijn worden opgeslagen (gebruik omhoog binnen 10 dagen).