Directe PCR van het installatiezaad Uitrusting I-UNG voor installatiezaden die lage polysaccharide en polyphenol componenten bevatten

Beschrijving:

Gebruikt de Directe PCR van het installatiezaad Uitrusting I-UNG een uniek lysis reactiesysteem, dat genomic DNA van de steekproeven van het installatiezaad met lage polysaccharide en polyphenol inhoud kan snel vrijgeven (zoals: de rijst, de tarwe, de tabak, het graan, de sojabonen, enz.) voor gebruik in PCR reacties, zodat het zijn in het bijzonder het geschikte genetische testen Op grote schaal. om aan de behoeften van verschillende opsporingstests te voldoen kan deze uitrusting veelvoudige types van steekproeven (zoals gehele zaden, kleine weefselbesnoeiingen, of grondsteekproeven van veelvoudige zaden) voor experimenten gebruiken. Onder hen, voor zaadsteekproeven die nog moeten zijn ontkiemd, kunt u verkiezen om micro-weefsel besnoeiingen (1-5mg) buiten het zaadembryo voor experiment te verwijderen; voor experimenten die in een groot aantal steekproeven moeten worden bemonsterd, kunt u verkiezen om veelvoudige steekproeven te mengen en hen te combineren. Na het malen in deeltjes met een diameter van ongeveer 0.5mm, kan het experiment worden uitgevoerd (minstens 0,1% van de doelsteekproef kan worden ontdekt).

Het proces om genomic DNA van het splitsingsreactiesysteem vrij te geven kan binnen 5-10 minuten worden voltooid. Er is geen behoefte aan andere processen om proteïne, RNA of secundaire metabolites te verwijderen, en de vrijgegeven spoorhoeveelheden DNA kunnen als malplaatje voor PCR reacties worden gebruikt.

2× zaadpcr EasyTM de Mengeling heeft sterke tolerantie aan PCR reactieinhibitors, en kan het lysis mengsel van installatiematerialen als malplaatje voor efficiënte en specifieke versterking direct gebruiken. Deze die reagens bevat de Polymerase van DNA van D-Taq van het bedrijf, dNTPs, MgCl2, de reactiebuffer, PCR de reactieversterker, optimizer, en stabilisator speciaal voor directe PCR wordt de gewijzigd. Gebruikt samen met lysis kan het reactiesysteem steekproeven snel en gemakkelijk ontdekken, en heeft de kenmerken van hoge gevoeligheid, sterke specificiteit, en goede stabiliteit.

2× zaadpcr EasyTM de Mengeling (UNG) gebruikt dUTP in plaats van dTTP op basis van 2× Zaadpcr EasyTM Mengeling, en voegt UNG-enzym (uracil-n-Glycosylase) toe dat kan het malplaatje degraderen die dUTP tegelijkertijd bevatten. Vóór de PCR reactie, wordt het UNG-enzym gebruikt om het PCR te degraderen product die uracil bevatten. Het UNG-enzym zal geen effect op het malplaatje hebben dat geen uracil bevat, daardoor verzekerend de specificiteit en de nauwkeurigheid van versterking en verhinderend de mogelijkheid van genetische testen het op grote schaal. De verontreiniging van PCR producten kwam voor

DNA-D-Taq de polymerase is een DNA-polymerase door Foregene voor directe PCR reacties speciaal wordt ontwikkeld die. DNA-D-Taq de polymerase heeft sterke tolerantie aan een verscheidenheid van PCR reactieinhibitors, en kan spoorhoeveelheden DNA in diverse complexe reactiesystemen efficiënt vergroten, en de versterkingssnelheid kan 2Kb/min bereiken, die voor Directe PCR reactie vooral geschikt is.

Volgens de verschillen in installatiesteekproeven, zijn de producten verdeeld in twee categorieën: Directe PCR van het installatiezaad Uitrusting en Directe PCR van het Installatiezaad plus Uitrusting. In het lysis stadium van mening is, dat dat de verschillende die types van zaden of weefselmaterialen zeer in de hoeveelheid reagentia variëren in het lysis proces worden gebruikt, kunnen de klanten het PCR overeenkomstige (klein en van het middelgrote) installatiezaad directe uitrusting of installatie (grote) zaad volgens de grootte van hun experimentele materialen Directe PCR uitrusting kiezen; in het PCR opsporingsstadium, kunnen de klanten gewone 2× Zaadpcr EasyTM Mengeling of 2× Zaadpcr EasyTM Mengeling (UNG) ook kiezen die de verontreiniging van PCR versterkingsproducten volgens de experimentele behoeften kunnen verhinderen.

Specificaties:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns

Uitrustingscomponenten:

Features&advantages:

- Geen reiniging van behoefte tijdrovende en dure DNA wordt vereist.

- De steekproefvraag is klein, neem enkel één enkel zaad.

- Geen speciale behandelingen zoals het malen en het verpletteren worden vereist, en de verrichting is eenvoudig.

- Het geoptimaliseerde PCR systeem laat PCR toe om hogere specificiteit en sterkere tolerantie aan PCR reactieinhibitors te hebben.

- De anti-vervuilings PCR PCR EasyTM van het systeem2× Zaad Mengeling (UNG) kan de verontreiniging effectief elimineren door PCR producten wordt veroorzaakt en de specificiteit en de nauwkeurigheid van versterking verzekeren die.

Uitrustingsparameters:

Toepassing: Identificatie van transgenic installaties, het genotyping, enz.

Steekproef: Installatiezaden of weefsels met lage polysaccharide en polyphenol inhoud.

Steekproefgrootte: Enig geheel zaad, 1-100mg installatieweefsel

Opsporingswaaier: PCR product ≤1kb

Toepassing

- Toepassingsgebied: een verscheidenheid van installatiezaden.

- DNA van steekproef dielysis wordt vrijgegeven: slechts gebruikt als PCR malplaatje.

- De uitrusting kan voor de volgende doeleinden worden gebruikt: identificatie van transgenic zaden, installatie het genotyping, enz.

De informatie van de uitrustingssamenstelling

- Buffer SP1: Verstrekt het vereiste milieu voor de lysis reactie van installatiezaden.

- Buffer SP2: Neutraliseer lysate zodat het niet de verdere PCR reactie beïnvloedt.

-2× zaadpcr EasyTM Mengeling (UNG): Bevat de speciale gewijzigde Taq-Polymerase van DNA, UNG-enzym, dNTPs, dUTP, MgCl2, reactiebuffer, PCR reactieversterker, optimizer en stabilisator, enz. Tijdens de PCR reactie, voeg enkel het aangewezen lysis mengsel, de inleidingen, en ddH2O aan de 2× Zaadpcr EasyTM Mengeling (UNG) dat voor de PCR reactie toe moet worden gebruikt.

-6× DNA-Ladingsbuffer: De Ladingsbuffer bevat geen SDS. Het wordt geadviseerd om de DNA-6× Ladingsbuffer te gebruiken inbegrepen met de uitrusting wanneer het uitvoeren van agarose gelelektroforese om goede elektroforeseresultaten te verkrijgen. Gebruik Ladings geen Buffer die SDS bevat, anders zal er een grote staart van helder licht in de steeg tijdens elektroforese zijn, die de experimentele resultaten zal beïnvloeden.

Het werkstroom:

Elektropherogram:

Opslag en Houdbaarheid:

- Een deel I van deze uitrusting zou bij kamertemperatuur of 2-8℃ moeten worden opgeslagen.

vReagents kan de Buffer SP1, Buffer SP2, DNA-6× Ladingsbuffer, in de droge omstandigheden, 12 maanden worden opgeslagen. Als u de uitrusting voor een langere tijd moet opslaan, kunt u het bij 2-8℃ opslaan.

- Een deel II van deze uitrusting zou bij -20℃ moeten worden opgeslagen.

de vReagent 2× Zaadpcr Gemakkelijke Mengeling, indien vaak gebruikt, het kan ook bij 4℃ voor opslag op korte termijn worden opgeslagen (gebruik omhoog binnen 10 dagen).

BIJLAGE I

De vergelijking tussen Directe PCR en traditionele PCR: