De Isolatieuitrusting DE-05011/05012/05013 van dierlijk Weefseldna voor Genomic-de Reiniging van DNA

De Isolatie Kit Cat van dierlijk Weefseldna. No.DE-05011/05012/05013 voor Genomic-de Reiniging van DNA van Beschaafd Cellen en Dier

De Isolatieuitrusting van dierlijk Weefseldna

Cat.No.DE - 05011/05012/05013

Voor genomic DNA-reiniging van beschaafde cellen en dierlijke weefsels

Product Descprition:

Deze uitrusting gebruikt een DNA-Enige kolom die DNA, Foregene-protease en een uniek buffersysteem kan specifiek binden. Genomic DNA van uitstekende kwaliteit kan uit diverse beschaafde cellen en dierlijke weefsels binnen 30 tot 50 minuten worden gehaald.

Het DNA-Enige die membraan van het kiezelzuurgel in de rotatiekolom is wordt gebruikt het unieke nieuwe materiaal van Foregene, dat effectief en specifiek aan DNA kan binden, en de verwijdering van RNA, onzuiverheidsproteïnen, ionen en andere organische verbindingen in cellen maximaliseren. 5-80μg genomic DNA van uitstekende kwaliteit kan van weefsel worden gezuiverd 10-50mg.

Productonderdelen:

Features&advantages:

- Geen RN-aseverontreiniging: De DNA-Enige die Kolom in de uitrusting wordt verstrekt maakt het mogelijk om RNA uit genomic DNA zonder extra RN-ase tijdens het experiment te verwijderen, daardoor verhinderend het laboratorium door exogene RN-ase worden vervuild.

- Snelle snelheid: De Foregeneprotease heeft hogere activiteit dan gelijkaardige proteasen en verteert sneller weefselsteekproeven;

- Eenvoudig: de genomic DNA-reinigingsverrichting kan binnen 50 minuten worden voltooid.

- Geschikt: Het centrifugeren wordt uitgevoerd bij kamertemperatuur, worden het centrifugeren 4℃ en de ethylalcoholprecipitatie van DNA niet vereist.

- Veiligheid: geen organische reagens wordt gebruikt.

- Hoge kwaliteit: Gezuiverde genomic DNA heeft grote fragmenten, geen RNA, geen RN-ase, en uiterst - lage ioneninhoud, die aan de vereisten van diverse experimenten kan voldoen.

Toepassingen van genomic DNA:

Genomic die DNA door de Isolatieuitrusting van Dierlijk Weefseldna heeft wordt gezuiverd hoge zuiverheid en kan voor routine moleculaire biologieverrichtingen, zoals worden gebruikt: enzymspijsvertering, PCR, Zuidelijke kruising, bibliotheekbouw en andere experimenten.

Productkwaliteitscontrole:

Overeenkomstig Totaal de Kwaliteitsbeheersysteem van FOREGENE, is elke partij de isolatieuitrustingen van dierlijk weefseldna strikt geteste veelvoudige tijden om de betrouwbaarheid en de stabiliteit van de kwaliteit van elke partij uitrustingen te verzekeren.

De extractieopbrengst en zuiverheid van Genomicdna:

De extractieopbrengst van dierlijk weefsel genomic DNA is verwant met de weefselbron, opslagvoorwaarden, opslagtijd, dosering en andere factoren. De zuiverheid van verkregen genomic DNA ontmoet de routine moleculaire biologie experimentele verrichting, en zijn OD260/280 is tussen 1.7-1.9. De gehaalde opbrengst van genomic DNA wordt gebruikend deze uitrusting getoond in de volgende lijst:

Voorzorgsmaatregelen: (Gelieve te zijn zeker om de voorzorgsmaatregelen zorgvuldig te lezen alvorens de uitrusting te gebruiken)

- De steekproef zou het herhaalde bevriezen en het ontdooien moeten vermijden, anders zullen de gehaalde DNA-fragmenten kleiner zijn en de extractieopbrengst zal worden verminderd.

- Alvorens de uitrusting te gebruiken, controleer zorgvuldig of er precipitatie in Buffer L1, Buffer L2 en Buffer PW is. Als er precipitatie is, te lossen gelieve het bij 37℃ op, mengen zich goed v3o3or gebruik.

- Alvorens de uitrusting te gebruiken, ben zeker om te controleren of Bufferwb met vochtvrije ethylalcohol volgens de instructies wordt toegevoegd. Bufferwb werd v3o3or gebruik toegevoegd met de vochtvrije ethylalcohol van 60ml (DE-05011), de vochtvrije ethylalcohol van 120ml (DE-05012) en de vochtvrije ethylalcohol van 300ml (DE-053013).

- Elution volume: De buffer EB zou niet moeten zijn minder dan 100μl, anders zal het de DNA-opbrengst beïnvloeden.

- Herinner me om RN-ase aan om het even welke Buffer niet toe te voegen.

- Alle centrifugerenstappen worden gecentrifugeerd bij kamertemperatuur (15-25℃) gebruikend een Desktop centrifugeren.

- Alle experimentele stappen werden uitgevoerd bij kamertemperatuur (15-25℃).

Opslag en Houdbaarheid:

- De uitrusting kan voor 12 maanden bij kamertemperatuur (15-25℃), of 2-8℃ voor langere tijd worden opgeslagen.

Nota: Indien opgeslagen bij lage temperatuur, is de oplossing naar voren gebogen aan precipitatie. V3o3or gebruik, ben zeker om de oplossing in de uitrusting bij kamertemperatuur voor een periode te plaatsen. Indien nodig, verwarm het in een water 37℃ voor - bad 10 minuten om het precipitaat op te lossen, en meng v3o3or gebruik het.

- De oplossing van de Foregeneprotease heeft een unieke formule en is actief lange tijd (3 maanden) bij kamertemperatuur; zijn activiteit en stabiliteit zullen wanneer opgeslagen bij 4℃ beter zijn, zodat wordt het geadviseerd om het bij 4℃ op te slaan, om het bij -20℃ sparen herinneren zich niet op te slaan.

Kolom DNA-slechts karakters

*: Het minimumelution systeem van 100μl is een redelijk geadviseerd die volume in overweging van DNA-terugwinningstarief en concentratie wordt gegeven. Als om de opbrengst van DNA te verhogen, het volume van eluate geschikt kan worden verhoogd; als om de concentratie van gezuiverde DNA te verhogen, het volume van eluate geschikt op het gebouw kan worden verminderd van het offeren van een deel van de DNA-opbrengst, zoals het gebruiken van een 50μl-elution systeem om hogere concentraties van DNA te verkrijgen.

De extractieopbrengst en zuiverheid van Genomicdna

De extractieopbrengst van dierlijk weefsel genomic DNA is verwant met de weefselbron, opslagvoorwaarden, opslagtijd, dosering en andere factoren. De zuiverheid van verkregen genomic DNA ontmoet de routine moleculaire biologie experimentele verrichting, en zijn OD260/280 is tussen 1.7-1.9. De gehaalde opbrengst van genomic DNA wordt gebruikend deze uitrusting getoond in de volgende lijst:

Nota: De gegevens in deze lijst zijn voor slechts verwijzing. In daadwerkelijke verrichting, zullen de verkregen gegevens van de gegevens in deze lijst toe te schrijven aan factoren zoals opslagvoorwaarden en werkende vaardigheid van de gebruikte materialen lichtjes verschillend zijn.

Werkschema

De Gids van de probleemanalyse

Het volgende is een analyse van de problemen die in de extractie kunnen worden ontmoet van genomic DNA van weefselsteekproeven, nuttig hopend aan uw experimenten te zijn. Bovendien voor andere experimentele of technische problemen buiten verrichtingsinstructies en probleemanalyse, hebben wij technische ondersteuning gewijd om u te helpen. Als u om het even welke behoeften hebt, gelieve ons te contacteren: 028-83360257 of e-Mali: ondersteuning.

Lage opbrengst of geen DNA

Er zijn gewoonlijk veelvoudige factoren die de opbrengst van genomic DNA, met inbegrip van steekproefbron, de voorwaarden van de steekproefopslag, steekproefvoorbehandeling, manipulatie, enz. beïnvloeden.

Genomicdna kon niet tijdens extractie worden verkregen

1. De weefselsteekproeven worden incorrect opgeslagen of te lang opgeslagen, resulterend in de degradatie van genomic DNA.

Aanbeveling: De steekproeven van het opslagweefsel in vloeibare stikstof of -80°C; probeer om onlangs verzamelde weefselsteekproeven voor genomic DNA-extractie te gebruiken.

2. Ook weinig weefselconsumptie kan tot het nalaten leiden om overeenkomstige genomic DNA te halen.

Suggestie: Voor weefselsteekproeven die lange tijd zijn opgeslagen of strenge genomic DNA-degradatie gehad, kan de hoeveelheid weefselsteekproeven geschikt worden verhoogd om aanzienlijke genomic DNA te halen. De hoeveelheid steekproef kan volgens DNA-behoeften worden bepaald, maar het zou geen 50mg moeten overschrijden.

3. Ongepaste opslag van Foregene-Proteaseresultaten in verminderde of buiten werking gestelde activiteit.

Aanbeveling: Bevestig de opslagvoorwaarden van Foregene-Protease of vervang het met een nieuwe Foregene-Protease voor enzymatische hydrolyse.

4. De uitrusting wordt incorrect opgeslagen of te lang opgeslagen, veroorzakend sommige componenten in de uitrusting om te ontbreken.

Aanbeveling: Koop een nieuwe de extractieuitrusting van dierlijk weefsel genomic DNA voor verwante verrichtingen.

5. Ongepast gebruik van de uitrusting. Bijvoorbeeld, sommige speciale uitrustingen van de weefselsbehoefte voor verwerking.

Aanbeveling: Het kopen van een uitrusting voor steekproeven, zoals de extractie van grond genomic DNA, vereist kopend een specifieke de Isolatieuitrusting van Gronddna.

6. Bufferwb zonder vochtvrije ethylalcohol toe te voegen.

Aanbeveling: Zorg ervoor om het correcte volume van vochtvrije ethylalcohol toe te voegen om voor WB als buffer op te treden.

7. Eluent werd niet behoorlijk gedropen op het kiezelzuurmembraan.

Suggestie: Voeg voorverwarmde eluent druppelsgewijze bij 65°C toe aan het midden van het membraan van het kiezelzuurgel, en verlaat het bij kamertemperatuur 5 minuten om de elution efficiency te verhogen.

Gehaalde genomic DNA met lage opbrengst

1. De steekproef wordt incorrect opgeslagen of te lang opgeslagen, resulterend in de degradatie van genomic DNA.

Aanbeveling: De steekproeven van het opslagweefsel in vloeibare stikstof of -80; probeer om onlangs verzamelde weefselsteekproeven voor genomic DNA-extractie te gebruiken.

2. Als de hoeveelheid weefselsteekproeven te klein is, zal gehaalde genomic DNA minder zijn.

Suggestie: Voor weefselsteekproeven die lange tijd zijn opgeslagen of strenge genomic DNA-degradatie gehad, kan de hoeveelheid weefselsteekproeven geschikt worden verhoogd om aanzienlijke genomic DNA te verkrijgen. De hoeveelheid steekproef kan volgens DNA-behoeften worden bepaald, maar het zou geen 50mg moeten overschrijden.

3. De bovenmatige hoeveelheid steekproef zal leiden tot onvolledige spijsvertering en onvolledig centrifugeren. De reinigingskolom kan tijdens centrifugeren op de kolom worden geblokkeerd, en gehaalde genomic DNA zal minder zijn.

Suggestie: Volgens verschillende weefsels, zou de dosering binnen 10-50 mg moeten worden aangepast. Wanneer de spijsvertering onvolledig is of de reinigingskolom wordt geblokkeerd, te verminderen gelieve de overeenkomstige weefseldosering.

4. De steekproef wordt niet onvolledig voorbewerkt of voorbewerkt.

Suggestie: Moeten de speciaal bewaarde steekproeven of sommige vrij speciale steekproeven vóór enzymatische hydrolyse worden vooraf behandeld, die kan de de oplossing of factoren die van het steekproefbehoud verwijderen proteaseactiviteit beïnvloeden, zodat de enzymatische hydrolysereactie kan grondiger worden uitgevoerd, en hogere opbrengst genomic DNA kan worden verkregen.

5. Speciale bewaarde weefselsteekproeven, zoals paraffine-ingebedde, rattenstaart, enz.

Aanbeveling: Koop een specifieke genomic DNA-extractieuitrusting, zoals paraffine-ingebedde steekproeven, kunt u FFPE de Isolatieuitrusting van DNA kiezen; de steekproeven van de muisstaart, u kunnen DNA Mini Kit kiezen van de Muisstaart. Deze weefsels worden behandeld met hun speciale uitrustingen, en de DNA-extractieopbrengst zal hoger zijn en het effect zal idealer zijn.

6. Ongepaste opslag van Foregene-Proteaseresultaten in verminderde of buiten werking gestelde activiteit.

Aanbeveling: Bevestig de opslagvoorwaarden van Foregene-Protease of vervang het met een nieuwe Foregene-Protease voor enzymatische hydrolyse.

7. Het eluent probleem.

Aanbeveling: Gelieve te gebruiken Buffer EB voor elution; als gebruikend ddH₂ O of andere eluents, ervoor zorg is pH van eluent tussen 7.0-8.5.

8. Eluent werd niet correct toegevoegd druppelsgewijze.

Suggestie: Voeg gelieve de elution daling aan het midden van het kiezelzuurmembraan toe en het bij kamertemperatuur 5 minuten te verlaten om de elution efficiency te verhogen.

9. Het eluent volume is te laag.

Suggestie: Gelieve te gebruiken eluent voor genomic DNA-elution volgens de instructies, minstens niet minder dan 100μl.

Gehaalde genomic DNA met lage zuiverheid

De lage zuiverheid van genomic DNA zal leiden tot de mislukking of het onbevredigende effect van stroomafwaartse experimenten, zoals: het enzym kan niet worden gesneden, en het fragment van het doelgen kan niet door PCR worden verkregen.

1. Diverse eiwitverontreiniging, RNAverontreiniging.

Analyse: De buffer PW werd niet gebruikt om de kolom te wassen; De buffer PW werd niet gebruikt om de kolom bij de correcte centrifugerensnelheid te wassen.

Aanbeveling: Probeer om ervoor te zorgen dat er geen precipitatie in de bovendrijvende substantie is wanneer de bovendrijvende substantie door de kolom wordt overgegaan; ben zeker om de reinigingskolom met Buffer PW volgens de instructies te wassen, en deze stap kan niet worden weggelaten.

2. Onzuiverheids ionenverontreiniging.

Analyse: De Bufferwb waskolom werd eens weggelaten of werd slechts gewassen, resulterend in overblijvende Ionische verontreiniging.

Aanbeveling: Ben zeker met Bufferwb volgens de instructies tweemaal wassen om overblijvende ionen zoveel mogelijk te verwijderen.

3. RN-aseverontreiniging.

Analyse: Exogene RN-ase wordt toegevoegd aan de Buffer; de onjuiste verrichting van de Bufferpw was resulteert in overblijvende RN-ase, die stroomafwaartse RNA experimentele verrichtingen, zoals transcriptie in vitro beïnvloedt.

Suggestie: Kunnen de uitrustingen van nucleic zuurextractie van de Foregenereeks RNA zonder extra RN-ase verwijderen, en alle reagentia in de Isolatieuitrusting van Dierlijk Weefseldna vergen geen RN-ase; ben zeker om de reinigingskolom met Buffer PW volgens de instructies te wassen, en deze stap kan niet worden weggelaten.

4. Ethylalcoholresidu's.

Analyse: Na het wassen van de reinigingskolom met Bufferwb, werd geen leeg buiscentrifugeren uitgevoerd.

Aanbeveling: Volg de instructies voor juist leeg buiscentrifugeren.

5. Andere onzuiverhedenverontreiniging.

Analyse: De bewaarde steekproeven of de speciale steekproeven werden niet voorbewerkt.

Aanbeveling: Behandel grondig de steekproef volgens de werkende instructies vooraf.